标准集团：SN/T 3084.2-2014 进出口化妆品眼刺激性试验 角膜细胞试验方法
发布时间：2023-02-131 范围
SN/T 3084的本部分规定了化妆品眼刺激性角膜细胞试验方法。
本部分适用于化妆品原料和成品眼刺激性体外筛选试验。
本部分适用于部分化妆品使用的表面活性剂的筛选测试。
本部分可作为眼刺激性动物试验的替代方法之一。可以结合其他眼刺激替代试验，对眼刺激效应进行综合评价。
本部分可作为其他领域眼刺激体外测试的参考方法。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
SN/T 2285 化妆品体外替代试验实验室规范
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
眼刺激性 eye irritation
眼球表面接触受试样品后产生的可逆性炎性变化。
3.2
SIRC细胞系 statens seruminstitut rabbit cornea cell line
来源于兔眼角膜组织的成纤维细胞系。
3.3
STE试验 short time exposure test
采用SIRC细胞进行的短时间暴露试验，本部分指5 min暴露试验。
4 原理 本试验采用来源于眼刺激靶器官的SIRC细胞系，将样本干预细胞5 min，然后去除。采用CCK-8 细胞毒性测试法（cell counting kit-8 cytotoxicity test)，使千预后的细胞与CCK-8试剂反应，活细胞线粒体中的脱氢酶会将CCK-8试剂还原成橙黄色的甲攒染料，活细胞越多，被还原成的染料越多，颜色深浅与细胞数目呈线性关系。通过测定波长450 nm时的吸光度值，计算细胞的生存率，判断样品的眼刺激性。本部分为STE短时暴露试验，适用于不同溶解性状的样本。
